Le CIMNA propose des analyses validées pour l’immunomonitorage sur différents types d’échantillons (sang frais, sang congelé, sérum, plasma, PBMC etc…). Avec son expertise, le CIMNA peut également développer de nouvelles techniques et ainsi répondre aux besoins spécifiques de vos projets.

Pour toute demande de renseignements complémentaires ou devis, n’hésitez pas à nous contacter selon les modalités suivantes :

  • Demandeur extérieur au CHU : à l’adresse mail cimna@chu-nantes.fr 
  • Demandeur interne au CHU : depuis la liste de diffusion du CHU LD-CIMNA 


Cytométrie en flux

La cytométrie en flux permet d’analyser individuellement des cellules en suspension après marquage par des anticorps spécifiques dirigés contres des marqueurs membranaires et intracellulaires couplés à des fluorochromes dont les signaux sont ensuite détectés et mesurés par les lasers d’un cytomètre en flux.

Applications :

  • Profils cellulaires et identifications des sous populations (fréquences et valeurs absolues, panels validés existants)
    • Lymphocytes : T, naifs/mémoires, T régulateurs, B, NK, NKT, MAIT/Tactivés, TCRgd, DCs, monocytes…
    • Cellules myéloïdes suppressives : MDSC
    • Monocytes classiques, non classiques, intermédiaires
    • Cellules dendritiques : cDC, pDC
    • Granulocytes : neutrophiles, éosinophiles, basophiles
    • Cellules lymphoïdes innées : ILC
    • Classes et sous-classes d’immunoglobulines membranaires (IgA1, IgA2, IgD, IgM, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4)
    • HLA-DR sur les monocytes
  • Analyse de la fonction cellulaire (ICS)
    • Test de phagocytose
    • Production de cytokines pas les lymphocytes T après stimulation
    • Production de cytokines pas les cellules dendritiques après stimulation
    • Production de cytokines pas les monocytes après stimulation
  • Mesure d’occupation de récepteur (receptor occupancy/RO)
  • Analyse des lymphocytes T spécifiques d’antigènes par tétramères
  • Développement de nouveaux panels à façon sur demande (jusqu’à 13 marqueurs simultanés)

Dosage de molécules solubles par analyses multiplex

Le CIMNA dispose de deux techniques pour répondre aux demandes d’analyses multiplex.

La première est la technique Luminex qui permet de doser simultanément de nombreuses cibles protéiques ou nucléiques (≤ 50 cytokines, chimiokines, facteurs de croissance…). A l’aide de billes magnétiques, ce procédé, basé sur la technologie xMAP®, repose sur le principe d'un ELISA combiné à de la cytométrie.

La deuxième technique proposée est le système ELLA. C’est une plateforme d’immunoessai automatisée (SimplePlexTM) ayant un système de détection rapide et très sensible de protéines dans différents types d’échantillons biologiques. Il s’agit d’un système de cartouche microfluidique permettant le dosage jusqu’à 8 analytes simultanément dans le même échantillon.

Applications :

  • Dosage d’analytes en multiplex sur sérum, plasma, surnageants de culture...
    • Dosage de cytokines, chemokines (inflammatoires et autres…)
    • Dosage d’immunoglobulines
    • Dosages d’analytes dans le cadre du métabolisme, cardiovasculaire, transplantation, cancer, neuroscience, osseux…

ELISA

L’ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) est une technique d’immunoabsorbtion par enzyme liée, principalement utilisée afin de détecter et/ou de doser un antigène ou un anticorps grâce à une réaction enzymatique colorimétrique.

Applications :

  • Dosage d’analytes en simplex sur sérum, plasma, surnageants de culture….
    • Dosage de cytokines, chemokines (inflammatoires et autres…)
    • Dosage de médicaments et d’anticorps anti médicaments (Infliximab, Vedolizumab…)
    • Dosage d’analytes dans le cadre du métabolismes, cardiovasculaire, transplantation, cancer, neuroscience, osseux…

Préparation et stockage d’échantillons

  • Isolement de PBMC par gradient de densité et congélation
  • Collection de sérum, plasma
  • Congélation de sang total pour analyse de cytométrie (méthode développée par la plateforme, cf Braudeau et al., Cytometry Part B, 2021)
  • Isolement de cellules par sélection magnétique pour congélation

Tests ex-vivo et analyses fonctionnelles

  • Stimulation de cellules pour analyses fonctionnelles (ELISpot, Cytométrie en flux, …)
  • Tests de prolifération cellulaire
  • Isolement de cellules par sélection magnétique pour tests ex-vivo

ELISpot

L’ELISpot est une technique qui permet de mesurer la fréquence de lymphocytes T sécréteurs de cytokines ou de lymphocytes B sécréteurs d’immunoglobulines à l’aide d’une technique immunoenzymatique en réponse à une stimulation spécifique ou non spécifique d’antigène.

Applications :

  • Analyse de production de cytokines sur cellules isolées après stimulation (antigènes viraux, antigènes vaccinaux…) par techniques immunoenzymatique


Expertise scientifique

Le Pr Régis JOSIEN, le Dr Jérôme MARTIN ainsi que toute l’équipe se mettent à votre disposition pour vous apporter leurs expertises pour vos projets dans le domaine de l’immunologie, en vous accompagnant du design de votre étude jusqu’à l’analyse des résultats.